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關(guān)于3M測(cè)試片的接種的使用及判讀方法

 3M測(cè)試片
 
 1.操作方法
 
①未開(kāi)封時(shí),置于≤8℃冷藏,注意外包裝上的保存期限,打開(kāi)包裝時(shí),應(yīng)在室溫條件下。已開(kāi)封的,應(yīng)用壓條或膠帶封口后,置于室溫,一個(gè)月內(nèi)用完。
 
②稱取樣品置于無(wú)菌均質(zhì)袋或均質(zhì)杯中,加入無(wú)菌稀釋液攪拌或均質(zhì)樣品,并用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調(diào)pH至6.5~7.2。
注意:無(wú)菌稀釋液不可使用含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液,這些稀釋液會(huì)抑制**的生長(zhǎng)。
 
③將測(cè)試片置于平坦表面處,保持水平,揭開(kāi)上層膜,移液器或滴管吸1ml樣液垂直滴加在測(cè)試片的正中央。然后將上層膜慢慢落下,盡量不要出現(xiàn)氣泡,切勿向下滾動(dòng)上層膜。
 
④將壓板的圓形內(nèi)凹面朝下,放置在上層膜的正中央,然后輕輕壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)基面積上,切不可扭轉(zhuǎn)壓板。
 
⑤拿起壓板,靜置1min以上等待培養(yǎng)基凝固。然后測(cè)試片的透明面朝上,*多可疊放20片,置于36℃培養(yǎng)48小時(shí),并保持培養(yǎng)箱的濕度。
 
 2.判讀3M測(cè)試片方法
 
①菌落總數(shù)測(cè)試片內(nèi),含有一種紅色指示染劑,可以使菌落呈現(xiàn)紅色便于計(jì)數(shù),計(jì)算所有紅色菌落,不論大小及顏色深淺。
 
②3M檢測(cè)片菌落計(jì)數(shù)的適宜計(jì)數(shù)范圍是25~250。
 
③測(cè)試片的計(jì)數(shù)面積約為20cm2。每一個(gè)黃色方框的面積是1cm2。當(dāng)菌落總數(shù)超過(guò)250個(gè)時(shí),為了估計(jì)菌落數(shù),可以選擇其中一個(gè)或幾個(gè)有代表性的小方框(1cm2)。計(jì)算平均菌落數(shù),然后再乘以20可得到測(cè)試片上的菌落數(shù)。
 
④當(dāng)測(cè)試片上的菌落太多而無(wú)法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),記錄為“TNTC”。
 
⑤有很高數(shù)量的菌落,使整個(gè)生長(zhǎng)區(qū)域變成粉色,或僅僅在生長(zhǎng)邊緣區(qū)域觀察到單個(gè)菌落,記錄為“TNTC”。
 
⑥有很高的菌落數(shù)量,并且有時(shí)菌落會(huì)出現(xiàn)分布不均勻的情況,記錄為“TNTC”。
 
⑦可以看到直徑較大的菌落,并且可以計(jì)數(shù),但是仔細(xì)觀察時(shí),會(huì)發(fā)現(xiàn)非常密集非常細(xì)小的菌落分布在計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi),此時(shí)記錄為“TNTC”。
 
⑧很少數(shù)量的菌種,會(huì)將測(cè)試片上的培養(yǎng)基液化,在計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)一個(gè)粉紅色的液化區(qū),此時(shí)不要記錄液化區(qū)內(nèi)的紅點(diǎn),應(yīng)選擇沒(méi)有被液化區(qū)域內(nèi)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),選取沒(méi)有液化部分的幾個(gè)有代表性的小方格(1cm2)。計(jì)算平均菌落數(shù),然后乘以20。得到結(jié)果。
 
⑨注意和樣品殘?jiān)w粒進(jìn)行區(qū)。有些樣品中會(huì)含有一些紅色的殘?jiān)w粒,菌落應(yīng)該是紅色規(guī)則的圓形,而顆粒的形狀是不規(guī)則的。如果樣品以紅色顆粒為主(比如辣椒粉),這類樣品的菌落總數(shù)檢測(cè),不宜采用3M菌落總數(shù)測(cè)試片。
 
3M大腸桿菌/大腸菌群測(cè)試片
 
1.操作方法 
操作方法與3M菌落總數(shù)測(cè)試片基本相同,只是不需要壓板,直接把1ml樣液加到中間紅色圓形區(qū)域內(nèi),然后將上層膜輕輕放下,盡量不要產(chǎn)生氣泡。然后可以輕輕的轉(zhuǎn)動(dòng)一下紙片,使樣液可以均勻地分布在中間紅色的圓形區(qū)域內(nèi)。
 
2.判讀方法
大腸菌群在紙片上呈現(xiàn)紅色菌落,緊貼著菌落有氣泡,大腸桿菌在紙片上呈藍(lán)色菌落緊貼菌落有氣泡。此時(shí)應(yīng)注意區(qū)分只有紅色或藍(lán)色菌落而沒(méi)有氣泡的情況,或者氣泡不是緊貼著菌落,或者只有氣泡無(wú)菌落生長(zhǎng),都不應(yīng)列入計(jì)數(shù)范圍。此外還應(yīng)區(qū)別樣品殘?jiān)湍繕?biāo)菌落。
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